Producción in vitro de interferón gamma en ratones vacunados con ´Mycobacterium habana´ frente a antígenos de Mycobacterium tuberculosis / In vitro interferon gamma production in mice vaccinated with ´Mycobacterium habana´ against Mycobacterium tuberculosis antigens

Introducción: el desarrollo de nuevas vacunas antituberculosas requiere de la caracterización de la respuesta de inmunidad celular, inducida por el nuevo candidato vacunal frente a los antígenos principales de Mycobacterium tuberculosis. Objetivo: determinar el potencial inmunogénico de ´Mycobacterium habana´ TMC-5135, cuando se usa como vacuna subcutánea en ratones Balb/c. Métodos: en este estudio se inocularon subcutáneamente ratones Balb/c con la cepa viva ´Mycobacterium habana´ TMC-5135 y se determinó la producción in vitro de IFN gamma en cultivos celulares de pulmón, bazo y ganglios inguinales estimulados con antígenos solubles totales y el antígeno 85b. Como grupo control se vacunaron ratones con BCG subcepa Phipps. Resultados: particularmente en los ganglios linfáticos inguinales, ambos antígenos indujeron mayor producción de IFN gamma en los ratones vacunados con ´Mycobacterium habana´que con BCG. Conclusiones: los resultados justifican la realización de nuevas investigaciones usando ´Mycobacterium habana´ TMC-5135 como candidato vacunal para prevenir la tuberculosis.

Introduction: development of new antituberculosis vaccines requires the characterization of the cell-mediated immune responses induced by mycobacterial antigens. Objective: to determine the immunogenic potential of ´Mycobacterium habana´ TMC-5135 when using subcutaneous vaccine in Balb/c mice. Methods: in this study, Balb/c mice were inoculated subcutaneously with live ´Mycobacterium habana´ TMC-5135. The production of IFN gamma in cell suspensions obtained from the lungs, the spleen and the lymph nodes after stimulation with mycobacterial antigens Ag85b or culture filtrate antigens (CFA) was recorded. Results: the production of IFN gamma after stimulation with CFA and Ag85b was higher in mice vaccinated with ´M. habana´ than in animals immunized with BCG. Conclusions: these results encourage new research on ´M. habana´ as vaccinal candidate against tuberculosis.

Control de calidad de la baciloscopia de esputo BAAR en laboratorios provinciales en Cuba / Quality control of acid fast bacilli of sputum smears microscopy in tuberculosis provincial reference laboratories in Cuba

Introducción: El laboratorio es un componente crítico en el diagnóstico, tratamiento, prevención y control de la tuberculosis. Objetivo: Analizar el comportamiento del control de calidad de la baciloscopia en los laboratorios de referencia provinciales de tuberculosis de Cuba, mediante el método de rechequeo de láminas a ciegas. Métodos: Se realizó el control de calidad, por el método de rechequeo de láminas, a 5 424 láminas de esputo BAAR recibidas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis y Micobacterias del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí, procedentes de los laboratorios de tuberculosis de los Centros Provinciales de Higiene, Epidemiología y Microbiología de Cuba, desde el año 2007 hasta 2009. Resultados: Se identificaron 54 errores de lectura; de ellos, 20 falsos positivos, 13 falsos negativos y 21 errores de codificación. La sensibilidad, especificidad y concordancia mostraron valores de 84,7, 99,6 y 99,4 porciento, respectivamente. La concordancia entre el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis y Micobacterias del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí y los laboratorios provinciales de tuberculosis evaluados fue de 99,4 porciento (Índice de kappa 0,8105) y la discordancia fue de solo el 0,6 pociento. Conclusiones: Los resultados sugieren una adecuada calidad del personal de los laboratorios provinciales para realizar el control de calidad de la BK de esputo BAAR. Se recomienda continuar con las visitas a los laboratorios de la red para detectar las deficiencias e implementar las medidas correctivas oportunas con el fin de seguir mejorando la calidad del diagnóstico de la baciloscopia y así eliminar la tuberculosis como problema de salud en Cuba

Introduction: The laboratory is a critical component in the diagnosis, treatment, prevention and control of tuberculosis. Objective: To analyze the behavior of quality control of bacilloscopy in provincial reference laboratories of Cuba, by the re-checkup of blind plates. Methods: The quality control was carried out by re-checkup method of plates at 5 424 plates of BAAR sputum received in the National Reference Laboratory of Tuberculosis and Mycobacteria of the Pedro Kourí Institute, originating in the laboratories of tuberculosis of Provincial Centers of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba from 2007 to 2009. Results: Fifty four reading errors were identified; from them 20 false-positive, 13 false-negatives and 21 coding error. The sensitivity, specificity and concordance showed values of 84.7, 99.6 and 99.4 percent, respectively. The concordance between the NRLTB PKI and the provincial tuberculosis laboratories assessed was of 99.4 percent (Kappa rate 0.8105) and the discordance was only of 0.6 percent. Conclusions: Results suggest an appropriate staff quality of the provincial laboratories staff to carry out the quality control of BAAR sputum BK. It is recommended to continue with visits to network laboratories to detect the deficiencies and to implement appropriate corrective measures to go on with the diagnosis quality of BK and so to eliminate the TB as a health problem in Cuba

El Laboratorio Nacional de Referencia y su contribución a la eliminación de la tuberculosis en Cuba / The National Laboratory of Reference and its contribution to the elimination of tuberculosis in Cuba

Se describe la participación del Laboratorio Nacional de Referencia e Investigaciones en Tuberculosis y Micobacterias del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí, en la organización del recurso bacteriológico para el diagnóstico y la búsqueda de casos, fundamentalmente en la atención primaria de salud, en apoyo al Programa Nacional de Control de la Tuberculosis. Se hace referencia a las funciones y principales actividades científicas de este Laboratorio Nacional, Centro Colaborador OPS/OMS, como cabecera de los laboratorios de la red de diagnóstico de la tuberculosis en el país. La introducción y aplicación de nuevas tecnologías de avanzada permite contar con valiosas herramientas para dar respuesta a los diferentes retos que plantean la tuberculosis y las micobacteriosis en la actualidad. Con la ejecución de un proyecto del fondo mundial de lucha contra el sida, la tuberculosis y la malaria, se ha fortalecido la red de diagnóstico, lo que debe contribuir, en un futuro cercano, a la eliminación de la tuberculosis como problema de salud en Cuba

The participation of the National Laboratory of Reference and Research on Tuberculosis and Mycobacteria of Pedro Kouri Institute of Tropical Medicine in the organization of the bacteriological resources for the diagnosis and screening of cases in the primary health care, in support of the national program for control of tuberculosis, was described in this paper. Reference was made to the functions and main scientific activities of this laboratory, which is a PAHO/WHO collaborating center at the forefront of the tuberculosis diagnosis laboratory network in the country. The introduction and the implementation of state-of-the-art technologies have allowed valuable tools to be used to meet several challenges posed by tuberculosis and mycobacteria nowadays. Thanks to the implementation of a World Fund against AIDS, tuberculosis and malaria project, the diagnosis network has strengthened, which must contribute to the elimination of tuberculosis as a health problem in Cuba in the near future

Meningitis y diseminación tuberculosa en paciente con el síndrome de inumodeficiencia adquirida (sida) / Meningitis and tuberculosis dissemination in acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) patients

Las meningoencefalitis por gérmenes oportunistas ocupan un lugar importante dentro de la patología neurológica del paciente sida, Treponema pallidum y Mycobacterium tuberculosis dentro de las bacterias, Cryptococcus neoformans dentro de los hongos, Toxoplasma gondii dentro de los protozoos y el Papovirus JC dentro de los virus, son de los gérmenes mas frecuentes dentro de cada grupo. También en los pacientes inmunodeprimidos en general y en particular en el paciente sida, se han encontrado con cierta frecuencia infecciones mixtas, precisamente por el gran deterioro en su barrera inmunológica. La meningitis tuberculosa (MTB) es la forma mas grave en que se manifiesta la tuberculosis extrapulmonar, pues la inespecificidad de sus síntomas, la lentitud en el diagnóstico etiológico y las severas secuelas neurológicas que puede producir sobre todo en este tipo de paciente, hacen de esta enfermedad un importante problema de salud, tanto en países desarrollados como en los que están en vías de desarrollo. En este estudio se describe el ¨primer caso¨ meningitis e infección diseminada por Mycobacterium tuberculosis en paciente cubano infectado por el virus de inmunodeficiencia humana

Meningoencephalitis due to opportunistic germs has an important place among the neurological diseases in AIDS patient. Treponema pallidum and Mycobacterium tuberculosis (bacteria), Cryptococcus neoformans (fungi), Toxoplasma gondii (protozoa), and Papovirus JC (virus) are the most frequently germs found in each group. Likewise, in immunodepressed patients in general and in HIV/AIDS patients in particular, mixed infections have been frequently found, basically as a consequence of the patient’s deteriorated immunological barrier. Tuberculosis meningitis (TBM) is the most severe form of presentation of the extrapulmonary tuberculosis. Its unspecific symptoms, the delay in the etiological diagnosis, and the severe neurological sequelae that can appear in this specific type of patient make of this disease an important health problem, in both developed and developing countries. This study describes the "first case" of meningitis and disseminated infection by Mycobacterium tuberculosis in a Cuban patient infected by the human immunodeficiency virus

Comportamiento de indicadores de calidad del cultivo en los laboratorios de diagnóstico de tuberculosis en la provincia de Las Tunas, Cuba / Behavior of quality indicators of cultures in the tuberculosis laboratories diagnosis in Las Tunas province, Cuba

El cultivo bacteriológico, es la prueba de oro para el diagnóstico definitivo de la tuberculosis (TB). La finalidad del control de calidad es mejorar continuamente la eficiencia y el uso del cultivo como una alternativa de diagnóstico y monitoreo, asegurando que la información generada por el laboratorio sea confiable y exacta. Método: Se calcularon los indicadores de calidad (IC) a 5799 cultivos de las muestras de esputo de pacientes con TB pulmonar confirmada bacteriológicamente, recibidas en los laboratorios de diagnóstico de TB de la provincia Las Tunas, 4721 del laboratorio del Centro Provincial de Higiene y Epidemiología (CPHE) y 1078 del laboratorio del Centro Municipal de Higiene y Epidemiología (CMHE) de Puerto Padre, en el período de octubre del 2003 a septiembre del 2005. Resultados: En el CPHE la tasa de contaminación (TC), el aporte del cultivo al diagnóstico (ACD) y el % baciloscopía positiva con cultivo negativo fue de 4.3%, 34.8% y 6.3% respectivamente. En el laboratorio del CMHE la TC presentó un valor de 7.6% y el resto de los indicadores fue de 0%. Conclusiones y recomendaciones: Los indicadores de calidad del cultivo en el laboratorio del CPHE de Las Tunas, exceptuando el % BK (+) CU (-), presentaron valores aceptables para un buen desempeño del laboratorio; en el laboratorio del CMHE de Puerto Padre los valores de los IC, a excepción del % BK (+) CU (-), fueron superiores establecidos por las normas internacionales. Recomendamos incorporar el cálculo de los IC a la red nacional de laboratorios que realizan cultivo, para conocer y evaluar los resultados del trabajo e incorporar la evaluación de la sensibilidad del medio de cultivo para mejorar el rendimiento y la calidad del diagnóstico de la TB

The bacteriological culture, it is the golden test for the definitive diagnosis of the tuberculosis (TB). The purpose of the quality control is improve the efficiency and use of culture like an alternative of diagnosis and monitoring, and assuring that the information generated by the laboratory are reliable and exact. Method: The quality indicators (QI) were calculated in 5799 sputum samples, from patients with pulmonary TB confirmed by bacteriological culture, received in the TB diagnosis laboratories from Las Tunas province, 4721 from TB Laboratory of the Hygiene and Epidemiology Provincial Center (HEPC) and 1078 from TB Laboratory of the Hygiene and Epidemiology Municipal Center (HEMC) of the Puerto Padre municipality, from October 2003 to September 2005. Results: In the HEPC the contamination rate (CR), the culture contribution to the diagnosis (CCD) and the percent of positive baciloscopy with negative culture (% BK+ CU -) was 4.3%, 34.8% and 6.3% respectively. In the laboratory of the HEMC the CR was 7.6% and the rest of the indicators were 0%. Conclusions and recommendations: The QI of culture in the HEPC laboratory from Las Tunas municipality, excepting the % BK (+) CU (-) presented acceptable values for a good performance, in the HEMC laboratory from Puerto Padre municipality, the IC values, to exception of the % BK (+) CU (-), were superiors to the established for the international norms. We recommended incorporate the calculation of QI in the national network of laboratories culture, in order to improve the yield and quality of TB diagnosis

Evaluación de los indicadores de calidad de la baciloscopía de tuberculosis en los laboratorios provinciales de diagnóstico de Cuba / Assessment of quality of the smear of TB in provincial diagnostic laboratories in Cuba

El control de calidad de la baciloscopía (BK), es un sistema diseñado para mejorar la habilidad, eficiencia y el uso de la microscopía, como opción de diagnóstico y monitoreo, asegurando que la información generada por el mismo, sea exacta, fiable y reproducible. El objetivo del estudio fue evaluar los indicadores de calidad de la BK en los laboratorios de diagnóstico de tuberculosis de los Centros Provinciales de Higiene y Epidemiología de Cuba. Se realizó el control de calidad a 2054 láminas en el periodo enero – diciembre del 2006, según lo establecido en el Manual de Procedimientos del Programa Nacional de Control de Tuberculosis. De las láminas evaluadas, 269 (13.1 por ciento) presentaron codificaciones altas, 81 (3,9 por ciento) codificaciones bajas y 1704 (83 por ciento) fueron negativas. La tasa de error para todos falsos positivos fue de 1,1 por ciento; no se identificaron resultados falsos negativos. El índice de kappa general obtenido fue de 0,9949. La sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo presentaron valores superiores al 99 por ciento. Estos resultados sugieren la calidad del personal que realiza la BK de tuberculosis en los laboratorios provinciales y recomendamos no descuidar las continuas supervisiones y mantener un programa de entrenamiento constante de los técnicos para continuar mejorando la calidad del diagnóstico baciloscópico en Cuba.

Introducción de nuevos métodos de control de calidad de baciloscopia de esputo BAAR, en el Laboratorio Nacional de Referencia del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí / Introduction of new sputum bacilloscopy quality control methods in the National Reference Laboratory of Pedro Kourí Institute

El Programa Nacional de Control de la Tuberculosis (TB) en Cuba, establece realizar el control de calidad (CC) externo de la baciloscopia (BK) a 100 por ciento de las láminas positivas y a 10 por ciento de las negativas, enviadas de forma mensual por los laboratorios de la red de diagnóstico de TB a los centros de referencia provinciales y al Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis y Micobacterias del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí (LNRTB IPK).

Evaluación del control de calidad de la baciloscopia en el diagnóstico de la tuberculosis en Cuba / Evaluation of quality control of baciloscopy in tuberculosis diagnosis in Cuba

Se evaluó el diagnóstico de tuberculosis en los laboratorios de los Centros Provinciales de Higiene y Epidemiología de Cuba incluido el municipio especial Isla de la Juventud. Se realizó el control de calidad a 4 382 láminas en el período enero-diciembre de 2004, según lo establecido en el Manual de Procedimientos del Programa Nacional de Control de Tuberculosis. Mostraron buena calidad en la extensión y coloración de Zielh Neelsen 4 003 (91,35 por ciento) láminas. El coeficiente de concordancia global del Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis en relación con los laboratorios provinciales fue de 99,79 por ciento. La sensibilidad y especificidad presentaron valores superiores a 99 por ciento. Estos resultados sugieren la calidad del diagnóstico de la baciloscopia de tuberculosis en los laboratorios provinciales y señalan la necesidad de no descuidar las continuas supervisiones, el monitoreo y el reentrenamiento en la técnica de baciloscopia, que sientan las bases para la introducción de los métodos de rechequeo a ciegas y panel de láminas dirigidas a perfeccionar la calidad del diagnóstico de tuberculosis en Cuba.

Micobacteriosis diseminada asomciada al complejo Mycobacterium avium-intracellulare (MAI), en paciente infectado con el virus de inmunodeficiencia humana / Disseminated mycobacteriosis associated with the Mycobacterium avium-intracellulare (MAI) complex in HIV infected patients

Se estudiaron diferentes tipos de muestras procedentes de una paciente de 27 años, diagnosticada como paciente SIDA luego de haber presentado un cuadro respiratorio agudo provocado por Pneumocistis carinii en 1997. A partir de ese momento la paciente siguió presentando cuadros respiratorios a repetición, hasta que ingresó en el Instituto de Medicina Tropical ôPedro Kouríö con cuadro diarreico crónico, pérdida de peso importante y anorexia extrema, acompañada de una constante tos húmeda, fiebre, etc. Se le realizaron los exámenes complementarios necesarios donde se resalta, un mantoux hiperérgico y niveles de células CD4 muy bajos (por debajo de 200 células/m3, conjuntamente se realizan estudios microbiológicos a partir de muestras de esputos, hemocultivos y líquido cefalorraquídeo, para descartar la presencia de bacilos ácido-alcohol resistentes. Como resultado de estos estudios se logró el aislamiento repetitivo en todos los tipos de muestras trabajadas de una cepa de crecimiento lento, cremosa no pigmentada, perteneciente al grupo III de Runyon, la cual fue clasificada como perteneciente al complejo Mycobacterium avium-intracellulare. La paciente fue sometida a tratamiento con 4 drogas antibacilares, sin obtener resultado, pues a las 4 semanas de tratamiento falleció a causa de la diseminación total de esta infección. Se debe destacar que este ha sido el primer caso reportado y diagnosticado microbiológicamente de mycobacteriosis generalizada en paciente VIH+ por Mycobacterium avium-intracellulare

Reporte de Mycobacterium avium-intracellulare asociado a micobacteriosis renal / Report of Mycobacterium avium-intracellulare associated with kidney mycobacteriosis

Se analizaron microbiológicamente, buscando la posible presencia de bacilos ácido-alcohol resistentes, repetidas muestras de orina procedentes de un paciente que presentaba imágenes radiológicas de riñones multiquísticos, al cual le habían realizado estudios complementarios que evidenciaban una deficiencia renal. Como resultado se logró el aislamiento de una cepa micobacteriana no pigmentada, de crecimiento lento perteneciente al grupo III de Runyon; esta fue clasificada como Mycobacterium avium-intracellulare por estudios bacteriológicos convencionales y alternativos, como el análisis de las fracciones de ácidos micólicos micobacterianos por la técnica de cromatografía en capa delgada

Identificación de cepas de Mycobacterium tuberculosis utilizando tiras de papel para la técnica de niacina

Se identificaron cepas de Mycobacterium tuberculosis con la utilización de tiras de papel para la técnica de niacina, elaboradas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis y Micobacterias del IPK. Se compararon los resultados obtenidos con la técnica de niacina convencional y se obtuvo el 100 % de coincidencia, se reportan las ventajas, sensibilidad y estabilidad de las tiras.

Estudio de micobacterias no tuberculosas aisladas en Cuba durante el período 1985-1989. Reporte preliminar / Study of non-tuberculous mycobacteria isolated in Cuba during 1985-1986. A preliminary report

Se estudiaron 1 061 cepas de micobacterias no tuberculosas referidas al Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" , en el período de 1985 a 1989. Las cepas procedían de los Centros Provinciales de Higiene y Epidemiología del país. Según los resultados globales obtenidos, la mayoría de las cepas clasificadas se ubican en los grupos III y IV de acuerdo con el criterio de Runyon (54,76 y 36 por ciento , respectivamente). Así mismo las especies de mayor frecuencia corresponden al complejo MAI y M. fortuitum